高效液相色譜儀分析中保留時間不重現的可能原因：

一、確認流動相是否新鮮配制的，比例有無錯誤。

二、確認色譜條件是否在色譜柱使用范圍內，如pH范圍、溫度和壓力。

三、仔細觀察柱前壓的變化。如果壓力穩定，可以判斷泵系統沒有問題。如果壓力不穩定，通常是由于泵內有氣泡造成的，一定會影響保留時間。將流動相仔細脫氣，并排出泵內氣泡。

四、觀察色譜峰形和柱效變化情況，確認色譜柱是否被污染。如果色譜柱被污染，可使用適當溶劑沖洗。

五、如果同時伴有色譜柱柱壓升高，降低柱壓。

六、如果使用梯度洗脫，確認平衡時間是否足夠長。流動相中使用離子對試劑（烷基磺酸鈉等）或固定相為正相硅膠等往往需要更長的平衡時間。

七、確認樣品是否過載。

八、組分在色譜柱中保留不夠。調整色譜條件，使樣品在柱上適當保留。

   

來源：http://www.fudizao.com